操作步驟：

1、打開PCR儀的熱蓋，插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。

2、打開PCR儀的電源，儀器程序開始初始化，需等待幾分鐘。

3、初始化完成后，顯示主菜單：

4、點“Browse/New Methods”，進入PCR程序列表：

5、可以直接點一個PCR程序，選擇“Start Run”運行；點右邊的符號，可以選 擇不同的文件夾。如要新建一個PCR程序，點“New”，出現PCR程序：

6、添加一段程序：點中上方的“Stage”位置，該位置變紅；再點“Add”，軟件將加入一段新的程序。

7、修改循環數、溫度、時間：點中循環次數、溫度或時間位置，下方出現數字鍵。依次點數字鍵，出現合適數字后，點“Done”確定。

8、增加一個步驟：點“Step”位置，該位置變紅；再點“Add”，軟件將加入一個新的步驟。

9、刪除一個步驟：點“Step”位置，在點“Delete”，軟件將該步驟刪除。

10、建立梯度模式：

                    1）點中一個步驟，再點“Option”鍵，出現選項如下

                    2）點“VeriFlex step”，出現梯度創建窗口：

輸入6個梯度溫度，溫度下方的“1－2”是指對應的1、2兩行加熱孔，全部輸好后，點“Done”確定。注意：相鄰的兩個梯度溫度之差不能*過5℃！

11、建立漸變模式：

                    1）點中一個步驟，再點“Option”鍵，出現選項如下

                    2）點“Auto Delta”，出現漸變模式創建窗口。

點“Staring Cycle”，輸入起始循環數；點“Delta Temperature”，輸入溫度變化值；點“Delta Time”，輸入時間變化值。漸變模式適用于touchdown PCR，可以提高PCR反應的特異性。例：輸入起始循環數為2，溫度變化值為＋0.5℃，時間變化值為＋5s，則表示從第2個循環開始，每循環一次升溫0.5℃，時間增加5s。

12、增加暫停步驟：

                   1）點中一個步驟，再點“Option”鍵，出現選項如下

                   2）點“Pause”，出現如下窗口。

輸入暫停的起始位置，暫停間隔和暫停時間，點“Done”確定。上圖表示每隔10個循環暫停10s，在10個循環的第1個循環之前暫停。

13、編輯PCR程序完成后，點“Save”保存。

點“Run Method”，輸入PCR程序名稱；點 ，選擇保存PCR程序的文件夾（如 果要保存在USB文件夾中，需要先插U盤）。再輸入反應體積和熱蓋溫度（這兩項在運行程序時可以修改）。點“SaveδExit”確定。

14、回到PCR程序列表界面，選擇新建的PCR程序。

15、點“Start Run”，出現運行參數設置窗口

 輸入反應體積和熱蓋溫度，點“Start Run Now”開始運行PCR程序。

16、儀器運行選中的PCR程序，顯示運行監視窗口

                    A- 運行狀態欄，顯示運行溫度和剩余時間

                    B- 加熱警示標記

                    C- 階段指示

                    D- 步驟溫度

                    E- 步驟時間

                    F- 步驟指示

                    C- 狀態報告，顯示日期、時間和儀器狀態

                    D- 延伸箭頭，點箭頭可以顯示更多的步驟 

16、暫停運行：  點“Pause Run”，儀器暫停，出現暫停選項欄

  “Remaining Time”顯示暫停剩余時間，“Elapse Time”顯示已暫停時間。 

如果需要修改暫停時間，點 ，輸入時間值，點“Done”確定；點“Resume Run”， 結束暫停，繼續運行PCR程序。

7、終止運行：點“Stop”可以終止整個PCR程序。

18、反應報告：

    PCR程序結束后，儀器會自動生成反應報告，顯示當次反應的各項指數。該報告可以保存和打印。

19、PCR反應結束后，打開熱蓋，取出樣品，關閉儀器電源。并開蓋放置，使熱蓋和加熱模塊正常降溫