詳述分光光度計的具體分類及應用

更新時間：2017-02-13

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詳述分光光度計的具體分類及應用

分光光度計，又稱光譜儀，是將成分復雜的光，分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區和波長范圍為200～380 nm的紫外光區。不同的光源都有其*的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。鎢燈的發射光譜：鎢燈光源所發出的380～780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續色譜；該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

分光光度計是一種分析測量光譜的儀器，因為應用需求的不同，分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為：

(1)可見光分光光度計
(2)紫外分光光度計
(3)紅外分光光度計
(4)熒光分光光度計
(5)原子吸收分光光度計。

現今生命科學領域比較流行的*微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。

(1)可見分光光度計

用來測量待測物質對可見光(400～760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計。可在600nm測定細菌細胞密度。

(2)紫外可見分光光度計

紫外可見分光光度計用來測量待測物質對可見光或紫外光(200～760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度，也可以測定細菌細胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區別。

a) 單光束：適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩定性。

b) 雙光束：自動記錄，快速全波段掃描。可消除光源不穩定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結構分析。儀器復雜，價格較高。

c) 假雙光束也就是比例雙光束，它的原理是由同一單色器發出的光被分成兩束，一束直接到達檢測器，另一束通過樣品后到達另一個檢測器。這種儀器的優點是可以監測光源變化帶來的誤差，但是并不能消除參比造成的影響。
(3)紅外分光光度計

一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜，這是研究有機化合物較為常用的光譜區域，能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣。

紅外光譜法的特點是：快速、樣品量少(幾微克-幾毫克)，特征性強(各種物質有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
(4)熒光分光光度計

熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。應用于科研、化工、醫藥、生化、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域。

通過對這些參數的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。

(5)原子吸收分光光度計
主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規儀器之一。是材料分析及質量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。

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